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 实验名称 3种分子标记分析罗非鱼选育群体的多态性效率比较
 关键字 罗非鱼、分子标记、多态性、比较
 实验目的 应用RAPD、AFLP、SSR等3种分子标记,对吉富品系尼罗罗非鱼选育群体的多态性进行了分析
 实验材料 本研究取广东省淡水名优鱼类种苗繁育中心吉富品系尼罗罗非鱼选育系F0、F6、F7、F8和F9共5个世代选育群体样本共108尾,在上海海洋大学检测3种分子标记的多态性效率。
 实验方法 DNA提取每尾样本剪取尾鳍约2g,分别编号后于95%乙醇中保存备用。总DNA提取采用SDS法,DNA质量用0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,用70%乙醇洗涤、干燥,加人200μlTE溶解DNA,放入-20℃冰箱储存。KAPD分析试验用10碱基随机引物购自上海Sangon公司。参照Williams等方法,反应在ABl2720型PCR仪上进行。反应混合液总体积为25ILL,其3Lbuffer(100mmol/LTirs—HC,pH95,500mmol/LKCl,0.01%明胶,最后调节pH值至8.0),lμLdNTPs(2.5mmol/L),2μL引物(5μmol/L),2μL基因组DNA(约40-200ng),1.2UTap酶,16.4μL无菌水,最后加入25μL石蜡油。反应循环条件为:94℃预变性4min;94oC、45s,36oC、45s,72oC、90s,40个循环;72oC延伸10min,4oC保温。取10μLPCR扩增产物经1.5%琼脂糖凝胶(含适量EB)电泳分离。 最后加入25斗L石蜡油。反应循环条件为:94℃预变性 4 min;940C、45S,360C、45S,720C、90S,40个循环;720C 延伸10min,4'E保温。取10μlPCR扩增产物经1.5%琼脂糖凝胶(含适量EB)电泳分离。
 实验数据 3种分子标记分析罗非鱼选育群体的多态性效率比较.docx
 实验结论 每一种分子标记方法都有其优缺点,SSR和AFLP是多态性效率相对比较高的分子标记技术。多种标记方法联合使用可能取得更为满意的效果。
 资助项目 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2007TS04)
 数据日期 2014/7/10
 数据来源 广东农业科学
 数据提供单位 渔业工程研究所渔业信息工程研究中心
 数据发布日期 2015/7/10